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光學濾光片組截止深度為什么要做到OD5以上?

更新時間:2022-04-08 點擊次數(shù):1679
  近年來隨著生命科學技術熒光探針技術、熒光顯微鏡、偏振熒光檢測技術、多光子熒光檢測技術、PCR基因擴增熒光定量檢測等生物醫(yī)學檢測技術不斷涌現(xiàn),對光學濾光片的陡度、背景深度提出了更高的技術要求。
 
  我們都知道光學濾光片是生物醫(yī)學領域中重要的檢測手段之一,光學濾光片組是進行激發(fā)光選擇和熒光提取的關鍵光學元件, 需根據(jù)所選試劑的激發(fā)、發(fā)射特性設計相應的濾光片光譜。一般我們要求要求濾光片背景深度在OD5以上,才能有較好的熒光成像效果。
 
  熒光試劑受激發(fā)射熒光的持續(xù)時間很短暫:發(fā)射熒光亮度相當于激發(fā)光能量的千分之一到萬分之一的量級,相對于激發(fā)光,熒光就顯得非常的微弱,二者共存于測試樣品中;并且熒光的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜波長間隔很小(15nm-30nm左右),所以我們要檢測到熒光信號,要把熒光系統(tǒng)中的激發(fā)光與發(fā)射光在光譜中相互深度隔離。隔離度達到OD4以上,才能檢測到樣品發(fā)射的熒光信號。為提高熒光檢測準確度,需要將隔離度提高到OD5以上。而且濾光片的隔離度越高,微量熒光的探測能力越強,熒光顯微鏡檢測精度越高。
 
  所以在熒光顯微鏡的濾光片的核心要求就是高截止陡度、濾光片高透過率、濾光片鄰域背景截止度。
 
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